Zellbank-Testung
In der Herstellung biotechnologisch hergestellter Arzneimittel ist die Identität, die Reinheit und die Qualität der mikrobiellen Produktionsstämme sowie eukaryotischen Produktionszelllinien essenziell für die pharmakologische Sicherheit und Wirksamkeit des Produktes.
Als biopharmazeutisches Fachlabor ist Tentamus Pharma & Med spezialisiert für den sensiblen Verantwortungsbereich der Zellbank-Analytik von prokaryotischen (z.B. E. coli) und eukaryotischen Zell-Linien (z.B. HEK-293, CHO). Wir überprüfen die Reinheit von Master Cell Banks (MCB), Working Cell Banks (WCB), End-of-production cells (EOPC) und natürlich die der Expressionsprodukte.
In-vitro-Analytik
zur Qualitätskontrolle von Arzneimitteln
Reinheitsprüfung von Bakterienzellbanken (prokaryotischen Zellbanken)
- Identitäts‑, Reinheits- und Qualitätsprüfungen an mikrobiellen Zellbanken, lebenden biotherapeutischen Produkten und therapeutischen Bakteriophagen-Präparaten
- Nachweis und Identifizierung von mikrobiellen Verunreinigungen
- Bakteriophagen-Präsenztest zur Überwachung und Kontrolle von Bakteriophagen-Kontaminationen in der Bioproduktion
- Viabilität
- Charakterisierung von Bakterienstämmen (Produktionsstämmen)
- Genotypisierung/Phänotypisierung (z. B. RFLP, RADP-Fingerprinting, Phagen Typisierung, biochemische Identifizierung durch API 20E, Identifizierung durch 16S rDNA oder ITS-Sequenzierung)
- Plasmid-Kopienzahl
- Plasmid-Retention (Plasmid-Stabilität)
- Überprüfung der Konsistenz der kodierenden Sequenz der Expressions-Konstrukte (Plasmide mittels PCR und Sequenzierung)
Test auf Bakteriophagen in bakteriellen Zellbanken und Fermentationsproben (validiert für E. coli)
- Nachweis von virulenten Bakteriophagen (lytischer Replikationszyklus)
- Nachweis von temperenten Bakteriophagen (lysogener Replikationszyklus)
- Nachweis von Prophagen
- Tests zur Identifizierung von Phagen und zum Nachweis von Bakteriophagen für andere Spezies als E. coli können auf Anfrage entwickelt und validiert werden
Herstellung und Sicherheitsprüfung von eukaryontischen Zellbanken
- Herstellung von eukaryotischen Master- und Working Zellbanken
- GMP konforme Expansion der Expressionslinie
- Herstellung der Master- und Working Zellbank (100 Vials)
- Zell-Identitätsprüfung mittels DNA Fingerprinting
- Kryokonservierung in flüssigem Stickstoff
- GMP konforme Sicherheitsprüfung der Expressionslinie
- Sterilität, Mykoplasmen, Zellviabilität, Verdopplungsrate, Expressionsstärke
- Nachweis viraler Kontamination im Zellkulturmodell MCB / WCB (Adventitious Agents in vitro nach Ph. Eur. 2.6.16 / 5.2.3)
- Testung über 14 und 28 Tage
- Nachweis von sehr niedrigen viralen Kontaminationen in biologischen Produktionen
- Kombination der Produktionszelllinie (oder verwandter Zelllinien) mit guideline-konformen Indikatorzelllinien
- Auswählbare virale Standards für relevante Arten
- Nachweis von tierischen Erregern (9CFR Testung)
- Bestimmungsnachweis: Zytopatscher Effekt (CPE), Hämadsorption (HAD), Hämagglutination (HA)
- Adventitious Agents qPCR basiert
- Human respiratory syncytial virus (HRSV) des Typ A und Typ B
- Human Papilloma virus (HPV)
- Human Hepatitis Virus (HAV / HBV / HCV)
- Influenza (Type A / B / C)
- Coronavirus (SARS-CoV‑2 / 229E / OC43)
- Human Cytomegalovirus (hCMV / HHV‑5)
- Auswahl von weiteren Viren nach Absprache
- Nachweis von Retroviren
- qPCR-Methode: Product enhanced reverse Transcriptase (F‑PERT)
- in vitro-Methode: S+ L- Assay
- Nachweis der infektiösen Kapazität viralen Vakzinen
- Testung der Produktionslinien
- Nachweis mittels Durchflusszytometrie
- Bestimmung des TCID50
- Bestimmung der Expression des genetischen Inserts
- Nachweis Replikations-kompetenter Viren
- Guideline konforme Grenzwert-Testung (z.B. > 1 ifu unter 3 × 10E10 virale Partikel für Adenoviren RCA)
- Bestimmungsnachweis: Zytophatischer Effekt, Immuncytochemie, qPCR